کیت AMH ELISA، یک ابزار پیشرفته تشخیصی است که به روش الایزا برای اندازه‌گیری کمی هورمون ضد مولرین (AMH) در سرم یا پلاسمای انسانی طراحی شده است. این کیت با دقت و حساسیت بالا، برای ارزیابی سلامت باروری و ذخایر تخمدانی در زنان و ارزیابی عملکرد اندام‌های تولید مثل استفاده می‌شود.
کیت AMH برای تعیین کمی غلظت هورمون AMH در نمونه‌های سرم یا پلاسما استفاده می‌شود. این کیت برای ارزیابی قدرت باروری، تشخیص نارسایی زودرس تخمدانی، تخمدان پلی‌کیستیک، و بررسی اثربخشی درمان‌های باروری کاربرد دارد. همچنین برای ارزیابی ذخایر فولیکولی و بررسی شرایط بالینی مرتبط با کاهش ذخایر تخمدانی به کار می‌رود.
کیت AMH ELISA، یک ابزار پیشرفته تشخیصی است که به روش الایزا برای اندازه‌گیری کمی آنتی مولرین هورمون (AMH) در سرم یا پلاسمای انسانی طراحی شده است. این کیت با دقت و حساسیت بالا، برای ارزیابی سلامت باروری و ذخایر تخمدانی در زنان و ارزیابی عملکرد اندام‌های تولید مثل استفاده می‌شود.
AMH توسط فولیکول‌های در حال رشد تخمدان ترشح می‌شود و شاخص مناسبی برای ارزیابی تعداد و کیفیت تخمک‌هاست. برخلاف FSH و استرادیول، سطح AMH در طول چرخه قاعدگی ثابت است و می‌توان آن را در هر زمان اندازه‌گیری کرد. این هورمون تحت تأثیر گنادوتروپین‌ها نیست و تنها بازتابی از ذخیره فولیکولی است. اندازه‌گیری AMH به ویژه در زنانی با ریسک کاهش ذخیره تخمدان مانند افراد مبتلا به سندرم تخمدان پلی‌کیستیک، سابقه خانوادگی یائسگی زودرس، آندومتریوز شدید، یا درمان‌های شیمی‌درمانی مفید است.
کیت AMH برای ارزیابی قدرت باروری، تشخیص نارسایی زودرس تخمدانی، تخمدان پلی‌کیستیک، و بررسی اثربخشی درمان‌های باروری کاربرد دارد. همچنین برای ارزیابی ذخایر فولیکولی و بررسی شرایط بالینی مرتبط با کاهش ذخایر تخمدانی به کار می‌رود.
1. دو چاهک برای کنترل، هفت چاهک برای استاندارد و به تعداد بیماران چاهک اختصاص دهید. چاهک‌های اضافی را با رطوبت‌گیر در کیسه قرار دهید. (استانداردها را دوتایی انجام دهید.)
2. ۱۰۰ میکرولیتر از نمونه‌ها، کنترل‌ها و استانداردها را داخل چاهک بریزید. برای هرکدام از سر سمپلر جدا استفاده شود.
3. پلیت را پوشانده و به مدت ۶۰ دقیقه در دمای اتاق (۲۵–۲۰ درجه سانتی‌گراد) انکوبه کنید.
4. چاهک‌ها را ۵ بار با ۳۰۰–۳۵۰ میکرولیتر محلول شستشو دهید. در هر بار ۲۰–۴۰ ثانیه محلول باقی بماند. سپس رطوبت را خشک کنید.
5. ۱۰۰ میکرولیتر از محلول آنتی‌بادی بیوتین به چاهک‌ها اضافه و پلیت را ۳۰ ثانیه آرام شیک کنید.
6. پلیت را پوشانده و به مدت ۳۰ دقیقه در دمای اتاق انکوبه کنید.
7. مشابه مرحله ۴، چاهک‌ها را شستشو دهید.
8. ۱۰۰ میکرولیتر از محلول استرپتواویدین HRP را اضافه و پلیت را ۳۰ ثانیه آرام شیک کنید.
9. پلیت را پوشانده و ۱۵ دقیقه در دمای اتاق انکوبه کنید.
10. شستشو طبق مرحله ۴ تکرار شود.
11. ۱۰۰ میکرولیتر محلول رنگ‌زا TMB به چاهک‌ها اضافه شود.
12. پلیت را ۱۵ دقیقه در دمای اتاق و دور از نور نگه دارید تا رنگ آبی ایجاد شود.
13. ۵۰ میکرولیتر محلول توقف اضافه و به‌آرامی مخلوط کنید. رنگ آبی به زرد تبدیل می‌شود.
14. جذب نوری را با فیلتر ۴۵۰ نانومتر و رفرنس ۶۳۰ نانومتر حداکثر تا ۱۰ دقیقه پس از توقف واکنش اندازه‌گیری کنید.
به دلیل تفاوت های بیولوژیک بین جمعیت های مختلف و همچنین عواملی نظیر سن، جنس، نژاد و عوامل جغرافیایی پیشنهاد می‌گردد هر آزمایشگاهی مقادیر نرمال بازه مرجع خود را بدست آورد:
| گروه سنی (Age Group) | میانگین (ng/mL) | صدک ۵ تا ۹۵ (ng/mL) |
|---|---|---|
| مردان بالای ۱۲ سال (Males >12 yrs) | 5.7 | 0.7 – 19 |
| پسران ۲۴ ماه تا ۱۲ سال | 60 | 7.4 – 243 |
| زنان ۱۳ تا ۲۵ سال | 4.9 | 0.85 – 13.0 |
| زنان ۲۶ تا ۳۰ سال | 4.07 | 0.1 – 8.5 |
| زنان ۳۱ تا ۳۵ سال | 3.12 | 0.1 – 7.0 |
| زنان ۳۶ تا ۴۰ سال | 1.81 | 0.09 – 6.1 |
| زنان ۴۱ تا ۴۵ سال | 0.72 | 0.05 – 3.9 |
| دختران ۲۴ ماه تا ۱۲ سال | 1.3 | < 8.9 |
| دختران زیر ۲۴ ماه | – | < 4.7 |
| زنان با ذخیره تخمدان کاهش یافته | – | < 1.0 |
| زنان یائسه | – | < 0.5 |
| سطح AMH (ng/mL) | تفسیر |
|---|---|
| کمتر از 0.36 | پایین بودن ذخیره تخمدان (POF) |
| 0.36 – 0.69 | حد پایین ذخیره تخمدان |
| 0.69 – 3.8 | محدوده نرمال ذخیره تخمدان |
| 3.8 – 8.9 | حد بالای ذخیره تخمدان |
حداقل غلظت قابل اندازه‌گیری AMH که از نمونه فاقد آنالیت قابل تمایز باشد را حساسیت گویند. این مقدار که بر اساس میانگین غلظت استاندارد صفر بعلاوه دو برابر انحراف معیار محاسبه گردیده است (بدست آمده از ۱۰ تست) 0.03 ng/ml می‌باشد.
